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HJ 755-2015 水質 總大腸菌群和糞大腸菌群的測定 紙片快速法

1 適用范圍
      本標準規定了測定水中總大腸菌群和糞大腸菌群的紙片快速法。

      本標準適用于地表水、廢水中總大腸菌群和糞大腸菌群的快速測定。

      本方法的檢出限為20 MPN/L。

2 術語和定義

      下列術語和定義適用于本標準。

2.1 總大腸菌群 total col iforms

      37℃培養,24h內能發酵乳糖產酸產氣的需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽抱桿菌。

2.2 糞大腸菌群fecal col iforms

      44.5℃培養,24h內能發酵乳糖產酸產氣的需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽抱桿菌。

2.3 最大可能數most probable number, MPN

      微生物檢驗常用發酵法,又稱稀釋法,是一種利用統計學原理定量檢測微生物濃度的方法。它根據不同稀釋度一定體積樣品中被檢微生物存在與否的頻率,查表求得樣品中微生物的濃度,與直接報告菌落數的平板計數法不同,它最終報告的是樣品中最有可能存在的目標微生物濃度,這個以最大可能存在的濃度,就被稱為最大可能數(most probable number,縮寫為MPN)。

3 方法原理

      按MPN法,將一定量的水樣以無菌操作的方式接種到吸附有適量指示劑(溴甲酚紫和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及乳糖等營養成分的無菌濾紙上,在特定的溫度(37℃或44.5℃)培養24 h,當細菌生長繁殖時,產酸使pH值降低,溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色,同時,產氣過程相應的脫氫酶在適宜的pH范圍內,催化底物脫氫還原TTC形成紅色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在產酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(或紅暈)。通過上述指示劑的顏色變化就可對是否產酸產氣作出判斷,從而確定是否有總大腸菌群或糞大腸菌群存在,再通過查MPN表就可得出相應總大腸菌群或糞大腸菌群的濃度值。

4 試劑和材料

      除非另有說明,分析時均使用符合國家標準的分析純化學試劑。

4.1 市售水質總大腸菌群和糞大腸菌群測試紙片:10 ml水樣量紙片、1ml水樣量紙片按以下方法進行質量鑒定,達到要求后方可使用。

      (1) 外層鋁箔包裝袋應密封完好,內包裝聚丙烯塑膜袋無破損。

      (2) 紙片外觀應整潔無毛邊,無損壞,呈均勻淡黃綠色,加去離子水或蒸餾水后呈紫色,無論加水與否,應無雜色斑點,無明顯變形,表面平整。

 

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