警告:操作人員應了解二噁英類分析操作的相關風險,并接受相關培訓。實驗中所使用的溶劑及標準樣品均為有毒有害化合物,其溶液配制應在通風柜中進行,操作時應按規定要求佩戴防護器具,避免接觸皮膚和衣物。
1 適用范圍
本標準規定了篩查固體廢物中二噁英類化合物的報告基因法。
本標準適用于固體廢物中二噁英類化合物的篩查。
標準溶液的檢出限和測定下限根據使用細胞的不同而異。當使用 H1L6.1c2 細胞時,標準溶液的檢出限為0.980pg·TEQ/ml(0.200pg-TEQ/well),測定下限為 1.96 pg-TEQ/ml(0.400pg-TEQ/well),當取樣量為3.5g時,方法測定下限為1.00pg-TEQ/g。
2 規范性引用文件
本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是不注日期的引用文件,其有效版本適用于本標準。
HJ 77.3 固體廢物 二噁英類的測定 同位素稀釋高分辨氣相色譜-高分辨質譜法
HJ/T 20 工業固體廢物采樣制樣技術規范
HJ/T 298 危險廢物鑒別技術規范
3 術語和定義
3.1 二 噁 英 類 polychlorinated dibenzodioxins (PCDDs) and polychlorinated dibenzofurans (PCDFs)
指多氯代二苯并-對-二噁英(PCDDs)和多氯代二苯并呋喃(PCDFs)的統稱。
3.2 芳香烴受體 arylhydrocarbon receptor
指一種配體激活的轉錄因子,其配體為二噁英類等多環芳烴,也可簡稱為 Ah 受體或 AhR。
3.3 報告基因 reporter gene
指一種位于啟動子下游,編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,其表達產物可以定量測定。
3.4 二噁英應答序列 dioxin responsive element (DRE)
指位于基因上的一段堿基序列。AhR 與配體結合后進入細胞核,與核轉錄因子接合形成復合體,DRE 可以與該復合體特異性識別并結合。
3.5 熒光素酶 luciferase
自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中最有代表性的為螢火蟲的螢光素酶。
3.6 傳代培養 subculture
指將凍存細胞或培養細胞的一部分,接種到新鮮培養基中繼續培養的操作。
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